Spleen regeneration after subcutaneous heterotopic autotransplantation in a mouse model

BACKGROUND: Splenectomy may lead to severe postoperative complications, including sepsis and cancers. A possible solution to this problem is heterotopic autotransplantation of the spleen. Splenic autografts rapidly restore the regular splenic microanatomy in model animals. However, the functional competence of such regenerated autografts in terms of lympho- and hematopoietic capacity remains uncertain. Therefore, this study aimed to monitor the dynamics of B and T lymphocyte populations, the monocyte-macrophage system, and megakaryocytopoiesis in murine splenic autografts. METHODS: The model of subcutaneous splenic engraftment was implemented in C57Bl male mice. Cell sources of functional recovery were studied using heterotopic transplantations from B10-GFP donors to C57Bl recipients. The cellular composition dynamics were studied by immunohistochemistry and flow cytometry. Expression of regulatory genes at mRNA and protein levels was assessed by real-time PCR and Western blot, respectively. RESULTS: Characteristic splenic architecture is restored within 30 days post-transplantation, consistent with other studies. The monocyte-macrophage system, megakaryocytes, and B lymphocytes show the highest rates, whereas the functional recovery of T cells takes longer. Cross-strain splenic engraftments using B10-GFP donors indicate the recipient-derived cell sources of the recovery. Transplantations of scaffolds populated with splenic stromal cells or without them afforded no restoration of the characteristic splenic architecture. CONCLUSIONS: Allogeneic subcutaneous transplantation of splenic fragments in a mouse model leads to their structural recovery within 30 days, with full reconstitution of the monocyte-macrophage, megakaryocyte and B lymphocyte populations. The circulating hematopoietic cells provide the likely source for the cell composition recovery.

Splenic implant preservation after conservation in lactated Ringer´s solution / Preservação de implante esplênico autógeno após conservação em solução de Ringer-lactato

ABSTRACT Objective: to evaluate the morphology and function of autogenous splenic tissue implanted in the greater omentum, 24 hours after storage in Ringer-lactate solution. Methods: we divided 35 male rats into seven groups (n=5): Group 1: no splenectomy; Group 2: total splenectomy without implant; Group 3: total splenectomy and immediate autogenous implant; Group 4: total splenectomy, preservation of the spleen in Ringer-lactate at room temperature, then sliced ​​and implanted; Group 5: total splenectomy, ​​spleen sliced and preserved in Ringer-lactate at room temperature before implantation; Group 6: total splenectomy with preservation of the spleen in Ringer-lactate at 4°C and then sliced ​​and implanted; Group 7: total splenectomy and the spleen sliced for preservation in Ringer-lactate at 4°C before implantation. After 90 days, we performed scintigraphic studies with Tc99m-colloidal tin (liver, lung, spleen or implant and clot), haematological exams (erythrogram, leucometry, platelets), biochemical dosages (protein electrophoresis) and anatomopathological studies. Results: regeneration of autogenous splenic implants occurred in the animals of the groups with preservation of the spleen at 4ºC. The uptake of colloidal tin was higher in groups 1, 3, 6 and 7 compared with the others. There was no difference in hematimetric values ​​in the seven groups. Protein electrophoresis showed a decrease in the gamma fraction in the group of splenectomized animals in relation to the operated groups. Conclusion: the splenic tissue preserved in Ringer-lactate solution at 4ºC maintains its morphological structure and allows functional recovery after being implanted on the greater omentum.

RESUMO Objetivo: avaliar morfologia e função de tecido esplênico autógeno, implantado no omento maior, 24 horas após conservação em solução de Ringer-lactato. Métodos: foram estudados 35 ratos machos, distribuídos em sete grupos (n=5): Grupo 1: sem esplenectomia; Grupo 2: esplenectomia total sem implante; Grupo 3: esplenectomia total e implante autógeno imediato; Grupo 4: esplenectomia total, preservação do baço em Ringer-lactato à temperatura ambiente, em seguida, fatiado e implantado; Grupo 5: esplenectomia total, baço fatiado e preservado em Ringer-lactato à temperatura ambiente antes de ser implantado; Grupo 6: esplenectomia total com preservação do baço em Ringer-lactato a 4°C e, em seguida, fatiado e implantado; Grupo 7: esplenectomia total e baço fatiado, para preservação em Ringer-lactato a 4°C antes de ser implantado. Após 90 dias, realizaram-se estudos cintilográficos com estanho coloidal-Tc99m (fígado, pulmão, baço ou implante e coágulo), hematológicos (eritrograma, leucometria, plaquetas), bioquímicos (eletroforese de proteínas) e anatomopatológicos. Resultados: ocorreu regeneração dos implantes esplênicos autógenos nos animais dos grupos com preservação do baço a 4ºC. A captação de estanho coloidal foi superior nos grupos 1, 3, 6 e 7 em relação aos demais. Não houve diferença nos valores hematimétricos nos sete grupos. A eletroforese de proteínas mostrou diminuição da fração gama no grupo de animais esplenectomizados em relação aos grupos operados. Conclusão: o tecido esplênico conservado em solução de Ringer-lactato à temperatura de 4ºC mantém sua estrutura morfológica e permite a recuperação funcional após ser implantado sobre o omento maior.

Influence of splenic implants in the subcutaneous tissue on asplenic animals survival / Influência de implante esplênico em subcutâneo na sobrevida de animais esplenectomizados

ABSTRACT Background: The best site for splenic implant was not defined, mainly evaluating the functionality of the implant. Aim: To evaluate the effects of autogenous splenic implantation on the subcutaneous tissue in the survival of splenectomized rats. Method: Twenty-one randomly assigned rats were studied in three groups (n=7): group 1 - manipulation of the abdominal cavity and preservation of the spleen; group 2 - total splenectomy; group 3 - splenectomy and implant of the tissue removed in the subcutaneous. The animals were followed for 90 days postoperatively. Results: There was a higher mortality in groups 2 (p=0.0072) and 3 (p=0.0172) in relation to group 1. There was no difference between groups 2 and 3 (p=0.9817). Conclusion: The splenic implant in the subcutaneous is ineffective in the survival of rats submitted to splenectomy.

RESUMO Racional: O melhor sítio para implante esplênico não foi definido, principalmente avaliando a funcionalidade do implante. Objetivo: Avaliar os efeitos do implante esplênico autógeno subcutâneo na sobrevida de ratos esplenectomizados. Métodos: Foram estudados 21 ratos alocados aleatoriamente em três grupos (n=7): grupo 1 - manipulação da cavidade abdominal e preservação do baço; grupo 2 - esplenectomia total; grupo 3 - esplenectomia e implante do tecido retirado no subcutâneo. Os animais foram acompanhados por 90 dias pós-operatórios. Resultados: Houve mortalidade maior nos grupos 2 (p=0,0072) e 3 (p=0,0172) em relação ao grupo 1. Não houve diferença entre os grupos 2 e 3 (p=0,9817). Conclusão: O implante esplênico no subcutâneo é ineficaz na sobrevida de ratos submetidos à esplenectomia.

Should splenic autotransplantation be considered after total splenectomy due to trauma? / Autoimplante esplênico deve ser considerado para pacientes submetidos à esplenectomia total por trauma?

ABSTRACT Trauma is a public health problem and the most common cause of death in people under the age of 45. In blunt abdominal trauma, the spleen is the most commonly injured organ. Splenectomy remains the most common treatment, especially in high-grade lesions, despite increased nonoperative treatment. Removal of the spleen leads to increased susceptibility to infections due to its role in the immune function. Postsplenectomy sepsis is an important complication and presents a high mortality rate. Patients undergoing splenectomy should be immunized for encapsulated germs, as these are the agents most commonly associated with such infections. Splenic autotransplantation is a simple procedure, which can be an alternative to reduce infection rates consequent to total splenectomy, and reduce costs related to hospitalizations. This review aims to provide evidence-based information on splenic autotransplantation and its impact on the prognosis of patients undergoing total splenectomy. We searched the Cochrane Library, Medline/PubMed, SciELO and Embase, from January 2017 to January 2018 and selected articles in English and Portuguese, dated from 1919 to 2017. We found that the adjusted risk of death in splenectomized patients is greater than that of the general population, and when total splenectomy is performed, splenic autotransplantation is the only method capable of preserving splenic function, avoiding infections, especially postsplenectomy sepsis. Health professionals should be familiar with the consequences of the method chosen to manage the patient suffering from splenic trauma.

RESUMO O trauma é um problema de saúde pública e a causa mais comum de óbito em pessoas com menos de 45 anos de idade. Nos traumas abdominais contusos, o baço é o órgão mais comumente lesado. A esplenectomia continua sendo o tratamento mais comum, especialmente em lesões de alto grau, apesar do aumento do tratamento não operatório. A remoção do baço gera aumento da suscetibilidade a infecções, devido ao seu papel na função imune. Sepse pós-esplenectomia é uma importante complicação e apresenta alta taxa de mortalidade. Pacientes submetidos à esplenectomia devem receber imunização para germes encapsulados, por serem os agentes mais comumente relacionados a essas infecções. Autoimplante esplênico é um procedimento simples, que pode ser alternativa para reduzir índices de infecção consequentes à esplenectomia total, e que pode reduzir custos relacionados à internações. Este trabalho de revisão objetiva prover informações baseadas em evidências sobre o autoimplante esplênico e seu impacto no prognóstico de pacientes submetidos à esplenectomia total. Foram realizadas buscas na Cochrane Library, Medline/PubMed, SciELO e Embase, de janeiro de 2017 a janeiro de 2018 e selecionados artigos em inglês e português, datados de 1919 a 2017. Verificou-se que o risco ajustado de morte em pacientes esplenectomizados é maior do que o da população geral, e quando a esplenectomia total é realizada, o autoimplante esplênico é o único método capaz de preservar a função esplênica, evitando infecções, principalmente sepse pós-esplenectomia. Profissionais de saúde devem estar familiarizados com as consequências do método escolhido para manejar o paciente vítima de trauma esplênico.

Phagocytic function of lower spleen pole and autogenous splenic implants in rats

PURPOSE: To investigate whether there are differences between the phagocytic function of the remaining lower spleen pole after subtotal splenectomy and autogenous splenic implants. METHODS: Thirty-six male Wistar rats, weighting 364 ± 60g were used. They were subjected to subtotal splenectomy preserving the lower spleen pole and to autogenous splenic implant in the greater omentum. Its viability was assessed microscopically. Phagocytic function was assessed by splenic uptake of the radioisotope-labeled colloid and by macrophages counting. RESULTS: The viability of the autogenous splenic implant and of the lower spleen pole was found in 33 animals, with no difference between them. The weight of the implants was higher than the lower pole of animals from groups G1, G7, G30, G60 and G120. The implants phagocytic function by radioisotope uptake was higher than the lower pole in G7 and G120 groups and it did not differ from the other groups. The number of macrophages was higher in G1, G60, G90 and G120 and did not differ from the other groups. CONCLUSION: Until the 16th week, the phagocytic function was more pronounced in autogenous splenic implants when compared with the lower spleen pole, but it became similar thereafter. .

Effects of splenic allograft in lipid profile of non-splenectomized rats: the immune and metabolic role of the "double spleen" / Efeitos do aloenxerto esplênico no lipidograma de ratos não esplenectomizados: papel imunológico e metabólico do "baço duplo"

OBJECTIVE: To elucidate the role of the spleen and splenic allograft in lipid control and evaluate its effect on the lipid profile of rats. METHOD: 32 male Wistar rats were randomly assigned into four groups: control group (1), total splenectomy group (2), splenectomy and implantation of allograft group (3) and double spleen group (4). Each group was subdivided into two subgroups: A and B, based on the death of the animals after 30 or 120 days of monitoring. The procedures in groups 2, 3 and 4 were made simultaneously, and splenectomized animals, groups 2 and 3 were donors, respectively, for the animals of groups 3 and 4. In group 4 the spleen was preserved and the animals received implants from the spleens of rats from group 3. The regeneration of splenic tissue was evaluated by macroscopic and microscopic analyzes of the grafts and own spleens, as well as with measurements of VLDL, HDL, LDL, total cholesterol and triglycerides. RESULTS: after 120 days, Group 4 showed levels of total cholesterol and LDL lower than the other groups. Group 1 had higher levels of lipids. CONCLUSION: The technique of double spleen was effective in the control of lipid metabolism, corroborating the function of the spleen as a reserve of lipids. .

OBJETIVO: Este estudo objetiva elucidar o papel do baço e do aloenxerto esplênico no controle lipídico e avaliar seu efeito no lipidograma de ratos. MÉTODO: Foram distribuídos aleatoriamente 32 ratos machos da linhagem Wistar em quatro grupos: grupo controle (1), grupo esplenectomia total (2), grupo esplenectomia e implante de aloenxerto (3) e grupo baço duplo (4). Cada grupo foi subdividido em dois subgrupos: A e B, com base na morte dos animais após 30 ou 120 dias de acompanhamento. Os procedimentos nos animais dos grupos 2, 3 e 4 foram feitos simultaneamente, sendo que os animais esplenectomizados, grupos 2 e 3, foram doadores, respectivamente, para os animais dos grupos 3 e 4. No grupo 4 preservou-se o baço dos animais e implantou-se outro baço oriundo dos ratos do grupo 3. A regeneração do tecido esplênico foi avaliada por análises macro e microscópicas dos enxertos e dos baço próprios, bem como dosagens de VLDL, HDL, LDL, colesterol total e triglicérides. RESULTADOS: O Grupo 4 apresentou, após 120 dias, níveis de LDL e colesterol total inferiores aos demais grupos. O Grupo 1 apresentou os níveis de lipidograma mais elevados. CONCLUSÃO: A técnica do baço duplo foi eficaz no controle do metabolismo lipídico, comprovando a função do baço como reserva de lipídios. .

Histological aspects of autologous transplantation of different fragments of the spleen in rats / Aspectos histológicos do transplante autólogo de diferentes fragmentos de baço em ratos

PURPOSE: To evaluate macro and microscopically the evolution of autotransplants of fragments of spleen different fragments in the greater omentum, after eight weeks of observation. METHODS: Twenty rats Wistar were used, males and adults, submitted to total splenectomy and divided in two groups. The group I - ten animals with implant of spleen fragment (25% weight of spleen) in the omentum; and group II - ten animals with implant of spleen fragment (30% weight of spleen) in the omentum. It was analyzed macro and microscopically the evolution of the implant. RESULTS: It was observed adherences to the adjacent tissues and vascularization in all of the fragments transplanted. The group I and II presented white pulp with follicular formations and lymphoid tissue preserved, and the red pulp in cordon aspect. The group II presented white pulp more disorganized and red pulp hemorrhagic. The active macrophages were observed in the group I and II. CONCLUSION: The splenic autotransplantation of the group I showed better regeneration.

OBJETIVO: Avaliar macro e microscopicamente a evolução do autotransplante de diferentes fragmentos de baço no omento maior, após oito semanas de observação. MÉTODOS: Foram utilizados 20 ratos Wistar, machos e adultos, submetidos a esplenectomia total e distribuídos em dois grupos. O grupo I - dez animais com implante de fragmento com 25% do peso do baço no omento e o grupo II - dez animais com implante de fragmento com 30% do peso do baço no omento. Foram observados macro e microscopicamente a evolução dos implantes. RESULTADOS: Foi observada no fragmento transplantado aderência aos tecidos adjacentes e vascularização preservada. Os grupos I e II apresentaram polpa branca e vascularização preservada, polpa branca com formação folicular e tecido linfóide preservado, e a polpa vermelha com aspecto cordonal. O grupo II apresentou polpa branca mais desorganizada e polpa vermelha hemorrágica. Os macrófagos ativos foram observados nos grupos I e II. CONCLUSÃO: O autotransplante esplênico do grupo I mostrou melhor regeneração.

Long-term following-up of viability of spleen autotransplants in the Beagle canine model / Avaliação em longo prazo da viabilidade do autotransplante de baço em cães Beagle

PURPOSE: To examine the possible late complications of splenectomy or spleen autotransplantation in large laboratory animal model, in which we need non-invasive or minimal-invasive methods for long-term monitoring of the experimental animals. METHODS: Experimental groups of beagle dogs were: non-operated control, sham-operated control, splenectomy, spleen autotransplantation with 5 or 10 spleen-chips taken into the greater omentum (Furka's technique). Prior to operations, on the 1st postoperative week, monthly till the 6th as well as in the 9th and 12th month, hemorheological examinations were performed. In postoperative 12th month colloid scintigraphy and diagnostic laparoscopy were carried out. At the end of the investigation comparative morphological examinations were performed, too. RESULTS: From the 4th-5th postoperative month filtration function of spleen-autotransplants showed particular restoration compared to splenectomy group. However, the functional results did not reach the values of the control or sham-operated groups. Sham-operated control's scintigraphy nicely showed activity in the spleen. In spleen autotransplantation-groups scintigraphy indicated well the activity of spleen-chips. During diagnostic laparoscopy spleen-chips with their blood supply were found. Histologically, the structure of spleen­autotransplants was similar to normal splenic tissue. CONCLUSIONS: The autotransplants are regenerated, their functions have been partly restored, and thus spleen autotransplantation may prevent the possible complications of splenectomy. These parameters and the presented investigative protocol are suitable for long-term following-up of viability of the spleen-autotransplants.

OBJETIVO: Examinar as possíveis complicações tardias da esplenectomia ou do autotransplante de baço em modelo animal de grande porte, no qual faz-se necessário o uso de métodos não invasivos ou minimamente invasivos para monitorizar os animais de experimentação. MÉTODOS: Grupos experimentais de cães beagle foram: não-operados controle, sham-operados controle, esplenectomia, autotransplante de baço com 5 ou 10 fatias de baço colocados no grande omento (técnica de Furka). Antes das operações, na 1ª semana de pós­operatório, mensalmente até 6o.assim como no 9º. e 12º. mês, foram realizados exames hemorreológicos. No 12º. mês de pós-operatório, cintilografia colóide e laparoscopia diagnóstica foram realizadas. Ao final do experimento, exames morfológicos comparativos foram realizados também. RESULTADOS: A partir do 4º-5º mês pós-operatório, a função de filtração dos baços autotransplantados mostraram particular restauração comparados ao grupo esplenectomia. Entretanto, os resultados funcionais não alcançaram os valores dos grupos controle ou sham-operados. A cintilografia dos controles sham-operados mostraram atividade no baço. Nos grupos de autotransplante, a cintilografia indicou bem a atividade das fatias de baço. Durante a laparoscopia diagnóstica, as fatias de baço com seu suprimento sanguíneo foram encontrados. Histologicamente, a estrutura dos autotransplantes de baço foi similar ao tecido normal de baço. CONCLUSÕES: Os autotransplantes são regenerados, suas funções foram parcialmente restauradas, e então ao autotransplantate esplênico pode prevenir as possíveis complicações da esplenectomia. Estes parâmetros e o protocolo experimental são adequados para o seguimento em longo prazo da viabilidade de autotransplantes esplênicos.

Consumo de óleo de peixe na resposta inflamatória em ratos submetidos a esplenectomia total isolada ou combinada com autoimplante esplênico e à indução de sepse abdominal / Consumption of fish oil on inflammatory response in rats submitted to total splenectomy or combined with autoimplantation spleen and induction of abdominal sepsis

Em órgãos potencialmente importantes na resposta imune, como o baço, alternativas como o autoimplante de segmentos esplênicos, quando a esplenectomia total torna-se necessária, e a utilização de nutrientes com funcionalidade imunomoduladora vêm sendo estudadas, objetivando minimizar o efeito pró-inflamatório persistente da sepse abdominal. O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito do consumo de óleo de peixe na modulação da resposta inflamatória em animais submetidos a esplenectomia total isolada ou combinada com autoimplante esplênico e à indução de sepse abdominal, verificando a possível otimização na resposta pró-inflamatória e a regeneração funcional do autoimplante. Utilizamos 64 ratos machos da linhagem Wistar, com peso variando entre 140-200 g, aleatoriamente distribuídos em oito grupos: quatro grupos-controle (100% óleo de soja) e quatro grupos-intervenção (35% de óleo de peixe), cada um com oito animais. Os dos grupos-controle (animais alimentados com ração purificada, segundo AIN-93, com conteúdo lipídico constituído por 100% óleo de soja) foram: I – sem intervenção cirúrgica e, 16 semanas após, submetidos à indução de sepse abdominal; II – esplenectomia total isolada e, 16 semanas após, submetidos à indução de sepse abdominal; III – esplenectomia total combinada com autoimplante esplênico e, 16 semanas após, submetidos à indução de sepse abdominal; e IV – esplenectomia total combinada com autoimplante esplênico e, oito semanas após, submetidos à indução de sepse abdominal. Os dos grupos-intervenção (V a VIII) foram submetidos a procedimentos similares aos executados nos grupos I a IV, respectivamente, sendo a única modificação fundamentada na substituição de 35% do conteúdo lipídico da alimentação dos animais por óleo de peixe. Todos os animais foram submetidos a sepse induzida por ligadura e perfuração cecal (CLP). Coletamos amostras sanguíneas de todos os animais antes da indução da sepse (período 1) e 2 e 4 horas (períodos 2 e 3...

In organs potentially important in the immune response, like the spleen, alternatives such as autotransplantation of splenic segments, when the total splenectomy becomes necessary, and the use of nutrients with immunomodulatory function have been studied, trying to minimize the effect of pro-inflammatory persistent abdominal sepsis. The aim of this study was to evaluate the effect of consumption of fish oil in modulating the inflammatory response in animals submitted to total splenectomy alone or combined with spleen autotransplantation and the induction of sepsis, verifying the possible optimization in the proinflammatory response and the functional regeneration of the autotransplant. We used 64 male Wistar rats, weighing between 140-200 g, were randomly distributed into eight groups: four control-groups (100% soybean oil) and four intervention-groups (35% fish oil), each one with ten animals. The rats in control groups (animals fed with purified according to the AIN-93 with lipid content consisting of 100% soybean oil) : I – without surgical intervention, and 16 weeks after, submitted to the induction of abdominal sepsis II – total spleenectomy alone, and 16 weeks after, submitted to the induction of abdominal sepsis; III – total splenectomy combined with spleen autotransplantation, and 16 weeks after, submitted to the induction of abdominal sepsis; and IV – total splenectomy combined with spleen autotransplantation, and 8 weeks after, submitted to the induction of abdominal sepsis. The rats in intervention groups (V to VIII) were subjected to similar procedures performed in groups I to IV, respectively, being the only modification based on the substitution of 35% of the lipid content of animal feed for fish oil. All animals were subjected to sepsis induced by cecal ligation and puncture (CLP). We collected blood samples from all animals before the induction of sepsis (period 1) and 2 and 4 hours (periods 2 and 3) after the induction of abdominal...

Efeito da suplementação dietética com L-arginina em subpopulações linfocitárias de ratos submetidos a esplenectomia total isolada ou combinada com autoimplante esplênico / Effect of dietary supplmentation with L-arginine on lymphocyte subpopulations of rats submitted to total splenectomy isolated or combined with splenic autoimplantation

A L-aginina é reconhecida como um nutriente de fundamental importância na resposta imune, apesar de seus efeitos serem, por vezes, considerados inconstantes. O autoimplante esplênico tem sido proposto como alternativa à esplenectomia total isolada, mas existem preocupações quanto à eficácia do restabelecimento da resposta imune, haja vista que o paciente pode permanecer com risco aumentado de desenvolvimento de infecção fulminante pós esplenectomia, mesmo após a regeneração morfológica do órgão. O objetivo deste estudo foi avaliar a participação da suplementação dietética com L-arginina em subpopulações linfocitárias no sangue, no baço e nos autoimplantes esplênicos de ratos submetidos a esplenectomia isolada ou combinada com autoimplante esplênico. Foram utilizados 42 ratos Sprague-Dawlay machos, randomicamente distribuídos em seis grupos: 1 - Controle - operação simulada; 2 - esplenectomia total; 3 - esplenectomia total combinada com autoimplante esplênico; 4 - Controle - operação simulada, com suplementação de L-arginina; 5 - esplenectomia total, com suplementação de L-arginina; e 6 - esplenectomia total combinada com autoimplante esplênico, com suplementação de L-arginina. Os animais dos grupos 4, 5 e 6 receberam suplementação de L-arginina, uma vez ao dia, durante 15 dias anteriores a coleta sangüínea realizada imediatamente antes dos procedimentos operatórios (semanas 0 e 12). A dose utilizada foi de 1,0 g/kg/dia, administrada por via intragástrica em bolus. As avaliações foram realizadas por meio de hemograma e citometria de fluxo. A análise estatística utilizou testes paramétricos e não-paramétricos, sendo p<0,05 considerado para a rejeição da hipótese nula. A suplementação com L-arginina acarretou elevação da contagem relativa e absoluta de neutrófilos periféricos, 12 semanas após a realização de esplenectomia total combinada com autoimplante esplênico. A esplenectomia total ocasionou diminuição da contagem relativa de linfócitos T totais, T CD4+...

L-arginine is recognized as a nutrient of fundamental importance in immune implants has been proposed as an alternative to total splenectomy isolated, but there are concerns about the effectiveness of the restoration of the immune response, considering that the patient can remain at increased risk of developing overwhelming postsplenectomy infection, even after morphological regeneration of the organ. The aim of this study was to determine the role of dietary supplementation with L-arginine in lymphocyte subsets in blood, spleen, and splenic auto-transplantation in rats subjected to total splenectomy alone or in combination with splenic auto-transplantation. Forty two male Sprague-Dawley rats, were randomly divided into six groups: 1 - Control - sham operation, 2 - total splenectomy, 3 - total splenectomy combined with splenic auto-implants, 4 - Control - sham operation, with L-arginine supplementation, 5 - total splenectomy, supplemented with L-arginine, and 6 - total splenectomy combined with splenic auto-implants, supplemented with L-arginine. Animals in groups 4, 5 and 6 were supplemented with L-arginine, once daily for 15 days before blood sample was collected immediately before the operative procedures (weeks 0 and 12). The dose was 1.0 g/kg/day administered by intragastric bolus. The laboratory evaluations were made by blood count and flow cytometry. Statistical analysis used parametric tests and nonparametric, p<0.05 was considered to reject the null hypothesis. Supplementation with L-arginine led to increase in relative and absolute count of peripheral neutrophils, 12 weeks after completion of total splenectomy combined with splenic auto-implants. Total splenectomy caused a decrease in relative count of T lymphocytes, CD4+ and CD8B in blood, but dietary supplementation with L-arginine prevented the decrease in the percentage of total T cells and CD8B in the blood of animals subjected to splenic auto-transplantation...

Aspectos morfológicos e funcionais dos autoimplantes esplênicos em ratos tratados com oxigenio hiperbárico / Splenic autoimplant and hyperbaric oxygen therapy in rats

OBJETIVO: Estudar aspectos morfológicos e funcionais dos autoimplantes esplênicos de ratos submetidos ou não à oxigenioterapia hiperbárica (OHB). MÉTODOS: Foram estudados em dois períodos distintos 105 ratos Wistar. No período mediato (n= 56) os animais foram avaliados até o 11º dia de pós-operatório, e no período tardio (n= 49), até o 70º dia. Em cada período os ratos foram distribuídos nos grupos: A- Simulação, B- Autoimplante esplênico, tratados com oxigênio hiperbárico ou não. Nos animais do Grupo A realizou-se apenas manipulação do baço. Nos animais do Grupo B realizou-se esplenectomia total e a seguir quatro fragmentos do baço foram implantados no grande omento. Em todos os animais foram dosados os lípides e imunoglobulinas e contadas as plaquetas e os corpúsculos de Howell-Jolly no pré-operatório e no 11º ou 70º dia de pós-operatório. O baço dos animais do Grupo A e os autoimplantes dos animais do Grupo B foram retirados e enviados para avaliação morfológica. RESULTADOS: No grupo B11nt houve aumento do colesterol total, LDL-colesterol, VLDL-colesterol e triglicérides. No grupo B70nt houve aumento do colesterol total e LDL-colesterol. Nos grupos tratados não houve alterações lipídicas. A IgM caiu nos grupos B e não alterou nos grupos A. Os corpúsculos de Howell - Jolly foram menos freqüentes nos grupos Bt que nos grupos Bnt. As plaquetas aumentaram nos grupos B11t e B11nt e não se alteraram nos demais grupos. A viabilidade microscópica dos grupos Bt foi melhor que a dos grupos Bnt. CONCLUSÃO: Os autoimplantes esplênicos dos animais tratados com OHB apresentaram melhor função e viabilidade do que os autoimplantes dos animais não tratados.

OBJECTIVE: To study the functional and morphological features of splenic autoimplants in rats subjected, or not, to postoperative hyperbaric oxygen therapy. METHODS: One hundred and five male Wistar rats, weighing 251.6 g ± 29.5 g, were studied ot early (11th day) and late (70th day ) postoperative periods. For each period the animals were distributed in the following groups: A (n=40), splenic manipulation; B (n=65),splenic autoimplants, not treated (nt) (A11nt- n=10, B11nt- n=21, A70nt- n= 10, B70nt-n= 18) and treated with hyperbaric oxygen (t) ( A11t- n= 10, B11t- n=15, A70t - n=10, B70t- n=11). Blood was collected for measurement of lipids and immunoglobulins , platelet and Howell-Jolly body count before and after surgery. The spleen and autoimplants were removed for histologic analyses. RESULTS: There was an increase of total cholesterol (p=0.00068), LDL-cholesterol (p=0.002), VLDL-cholesterol and triglycerides (p=0.0033) in B11nt group. There was an increase of total cholesterol (p= 0.0007) and LDL-cholesterol (p=0.0000) in B70nt group, and no alterations were observed in the other groups. IgM decreased in B groups (p=0.0000) and no changes were observed in the splenic manipulation group. Number of Howell-Jolly bodies were lesser in Bt groups than in Bnt groups( p=0.03). Platelets were increased in B11t and B11nt groups (p=0.0000) and remained unchanged in the other groups. Autoimplants microscopic viability was better in Bt groups than in Bnt. CONCLUSION: The splenic autoimplants of rats treated with hyperbaric oxygen therapy showed a better functionality and viability than those subjected to other procedures.

Aspectos histológicos de fragmentos esplênicos autotransplantados em ratos / Histopathologic aspects of splenic fragments autotransplanted in rats

Estudou-se a viabilidade do autotransplante de tecido esplênico, um terço do baço, associado à esplenectomia parcial, e verificou-se a cinética evolutiva de sua regeneração, sob o aspecto macroscópico e histológico. Foram utilizados 28 ratos Wistar, adultos, machos, com média de peso de 300g, distribuídos em quatro grupos experimentais. Cada animal foi submetido à esplenectomia parcial, e um fragmento de baço foi transplantado para o omento maior, por períodos de 30, 60, 90 e 120 dias. Após cada período pré-estipulado, os tecidos esplênicos autotransplantados foram coletados e analisados histologicamente. Os resultados mostraram regeneração da cápsula esplênica, dos vasos sanguíneos e das polpas branca e vermelha. Aos 90 dias, a arquitetura microscópica apresentava-se semelhante à do baço normal.

The splenic tissue autograft viability (one third of the spleen) associated to parcial splenectomy was studied to verify the evolutive kinetic of its regeneration by macroscopic and histological aspects. Twenty-eight adult male Wistar rats, weighting 300g, were distributed in four experimental groups. Each animal was submitted to parcial splenectomy and one fragment of each spleen was autotransplanted to the greater omentum, for a period of 30, 60, 90, and 120 days. After each period, the autotransplanted splenic tissues were collected and histopathologically analyzed. The results showed regeneration of the splenic capsule, blood vessels, white pulp, and red pulp. After 90 days, the microscopic architecture was similar to the normal spleen.

Late histological aspects of spleen autologous transplantation in rats / Aspectos histológicos tardios do transplante autólogo de baço em ratos

PURPOSE: To evaluate macro and microscopically the late evolution of autotransplants of fragments of spleen in the greater omentum, mesenterium and peritoneal cavity, after 24 weeks of observation. METHODS: Fifty two Wistar rats were used, males and adults, submitted to total splenectomy and divided in four groups. The group I - seventeen animals with implant of spleen fragment in the peritoneal cavity; group II - eighteen animals with implant in the omentum and group III - seventeen animals with implant fixed in mesenterium root. The group control (group IV) was formed by eight animals chosen aleatorily among the three groups. It was analyzed macro and microscopically the evolution of the implant, and in the histological study qualitative and quantitative criteria were adopted, with the counting of no cellular e cellular elements. RESULTS: It was observed adherences to the adjacent tissues and vascularization in all of the fragments transplanted. The group I presented white pulp and preserved vascularization. In the group II were observed white pulp with follicular formations and lymphoid tissue preserved, and the red pulp in cordon aspect and hemorrhagic. In the group III were observed with depletion of white and red pulp, while others evidenced better preservation of the pulps. The counting of lymphocytes revealed significant difference between the groups I and IV and the group III and IV (p < 0.05). The counting of active macrophages revealed significant difference between the groups II and III (p < 0.05) and similarity between II and IV (p > 0.05). The other elements: active macrophages phagocyting hemosiderine, plasmocytes, fibroblasts, fibrocytes, giant cells, monocytes, interstitial spaces and fibers of collagen, did not show significant difference among the groups. CONCLUSIONS: The splenic autotransplantation is feasible, being the better place the greater omentum. This research demonstrated through qualitative and quantitative...

OBJETIVO: Avaliar macro e microscopicamente a evolução tardia do autotransplante de fragmentos de baço no grande epiplon, mesentério e cavidade peritoneal, após 24 semanas de observação. MÉTODOS: Foram utilizados 52 ratos Wistar, machos e adultos, submetidos a esplenectomia total e divididos em quatro grupos. O grupo I - dezessete animais com implante de fragmento de baço solto na cavidade peritoneal; grupo II - dezoito animais com implante no grande epiplon e grupo III - dezessete animais com implante fixado na raiz do mesentério. O grupo controle (grupo IV) foi formado por oito animais escolhidos aleatoriamente entre os três grupos. Foram analisados macro e microscopicamente a evolução do implante, sendo que no estudo histológico foram adotados critérios qualitativos e quantitativos, com a contagem de elementos celulares e não celulares. RESULTADOS: Foram observadas aderências aos tecidos adjacentes e neovascularização em todos os fragmentos transplantados. O grupo I apresentou polpa branca e vascularização preservada. No grupo II foram observadas polpa branca com formação folicular e bainha linfóide, e a polpa vermelha em aspecto cordonal apesar de hemorrágica. No grupo III foram observados alguns cortes histológicos com depleção de polpa branca e vermelha, enquanto outros evidenciavam melhor preservação das polpas. A contagem de linfócitos revelou diferença significativa entre os grupos I e IV e o grupo III e IV (p<0,05). A contagem de macrófagos ativos revelou diferença significativa entre os grupos II e III (p<0,05) e similaridade entre II e IV (p>0,05). Os outros elementos: macrófagos ativos fagocitando hemossiderina, plasmócitos, fibroblastos, fibrócitos, células gigantes, monócitos, espaços intersticiais e fibras de colágeno, não apresentaram diferença significativa entre os grupos. CONCLUSÕES: O autotransplante esplênico é factível, sendo o grande epiplon o melhor local para a sua fixação. Esta pesquisa demonstrou por meio de...

Preservative spleen surgery and hyperbaric oxygen therapy

PURPOSE: To assess functional and morphological aspects of spleen auto-implants and of the splenic inferior pole of rats, post-operatively treated or not with hyperbaric oxygen, as well as the survival of these animals, were studied. METHODS: Seventy-eight male Wistar rats, weighing between 192 and 283 g ( 238,3 ± 9,6g), were randomly distributed into three groups: Group1-(n=20), spleen manipulation; group 2-(n=36), spleen auto-implantation; group3-(n= 22), subtotal splenectomy preserving the inferior pole. Each group was subdivided as follows: subgroup a, not submitted to hyperbaric oxygen therapy: 1a(n=10), 2a(n=21), 3a(n= 13); subgroup b, submitted to the therapy: 1b(n=10), 2b(n=15), 3b(n=9). Blood was collected pre-operatively and 11 days after surgery, for the estimation of lipids and immunoglobulins and the counting of platelets and Howell-Jolly corpuscles. The spleen and remains were taken for histological study. RESULTS: The number of surviving animals was significantly higher in groups 1(p<0,01) and 3(p<0,05) relative to those of subgroup 2a. Total cholesterol and the LDL fraction increased significantly in subgroup 2a (p<0,01) and 3a (p<0,05), and remained unaltered in subgroups 2b e 3b. IgM decreased more significantly in subgroup 2 than in subgroup 3 (p<0,001 vs p<0,01). The increase of platelet numbers and the appearance of Howell Jolly corpuscles was smaller in subgroup 2b compared to subgroup 2a , and in group 3 compared to group aqui-> 2. The macro and microscopic appearance in subgroup 2b were more viable than in subgroup 2a, and that of group 3 more viable than in group 2. The survival of the animals carrying their whole spleen or its inferior pole was more frequent than that of the auto-implanted animals. CONCLUSION: Functionality and viability of the whole spleen or of its inferior pole, were better than in the auto-implanted animals. Hyperbaric oxygentherapy contributed to increased survival frequency of auto...

OBJETIVO: Estudar aspectos funcionais e morfológicos dos auto-implantes esplênicos e do pólo inferior do baço de ratos, tratados ou não com oxigênio hiperbárico no pós-operatório, e a sobrevida desses animais. MÉTODOS: Foram operados 78 ratos, machos, Wistar, pesando entre 192 g e 283 g ( M.A 238,3 ± 9,6) , distribuídos aleatoriamente em três grupos : 1-(n=20) , manipulação do baço; 2-(n=36), auto-implante esplênico; 3(n= 22), esplenectomia subtotal com preservação do pólo inferior. Cada grupo foi dividido em dois subgrupos: a- não submetido à oxigenoterapia hiperbárica: 1a(n=10), 2a(n=21), 3a(n= 13); b- submetido: 1b(n=10), 2b(n=15), 3b(n=9). O sangue foi colhido para dosagem dos lípides e imunoglobulinas e contagem das plaquetas e dos corpúsculos de Howell-Jolly no pré-operatório e 11 dias após a cirurgia. O baço e os remanescentes foram retirados para estudo histológico. RESULTADOS: O número de animais sobreviventes foi significantemente maior nos grupos 1(p<0,01) e 3(p<0,05) em relação ao subgrupo 2a. O colesterol total e a fração LDL aumentaram significantemente nos subgrupos 2a (p<0,01) e 3a(p<0,05), e não alteraram nos subgrupos 2b e 3b. A IgM caiu mais significantemente no grupo 2 que no 3. O aumento do número de plaquetas e o aparecimento dos corpúsculos de Howell Jolly foi menor no subgrupo 2b que no 2a, no grupo 3 que no grupo 2. O aspecto macro e microscópico no subgrupo 2b foi mais viável que no subgrupo 2a, e o do grupo 3 mais viável que no grupo 2. A sobrevida dos animais com todo o baço ou com o pólo inferior foi mais freqüente que a dos animais com auto-implantes. CONCLUSÕES: A função e a viabilidade de todo o baço ou do pólo inferior foram melhores que a dos auto-implantes. A oxigenoterapia hiperbárica contribuiu para aumentar a freqüência de sobrevida dos animais com auto-implantes, para melhorar a função e a viabilidade dos auto-implantes e a função do pólo inferior, e não interferiu nos animais com baço íntegro.

Lipidic profile among rats submitted to total splenectomy isolated or combined with splenic autotransplant

PURPOSE: To evaluate the alterations on plasmatic lipids levels among rats submitted to total splenectomy isolated or combined with splenic autotransplant receiving standard chow during the postoperative period. METHODS: Thirty Wistar rats were divided into three groups: control (C) - sham-operated, total splenectomy - isolated (TS) or combined with splenic autotransplantation (SA). Since the postoperative period, all animals received standard rat chow manipulated in accordance to the American Institute of Nutrition Rodents Diets (1993). The plasmatic levels of total cholesterol (TC), triglycerides (TG), high-density lipoprotein (HDL), low-density lipoprotein (LDL), very-low-density lipoprotein (VLDL), and glucose (GLUC) were analyzed before the surgical procedure and after 6 and 12 weeks. RESULTS: All the animals presented significant increase of TG and VLDL levels. In relation to the other parameters there was no difference among the weeks 0 and 12 in the animals of group C. In TS group significant increase was observed in TC and GLUC levels during the experiment. In SA group TC, HDL, and GLUC levels remained unaffected while HDL levels increased. CONCLUSION: Our findings suggest that isolated total splenectomy alters lipids metabolism in rats fed with standard chow and splenic autotransplantation is effective in restoring its control.

OBJETIVO: Avaliar as alterações nos níveis de lipídios plasmáticos em ratos submetidos a esplenectomia total isolada ou combinada com auto-implante esplênico, recebendo dieta padrão no período pós-operatório. MÉTODOS: Trinta ratos Wistar foram distribuídos em três grupos: controle (C) - operação simulada, esplenectomia total isolada (ET) ou combinada com auto-implante esplênico (AE). A partir do período pós-operatório, todos os animais receberam ração padrão, manipulada segundo o American Institute of Nutrition (1993). Os níveis plasmáticos de colesterol total (CT), triglicerídeos (TG), lipoproteína de alta densidade (HDL), lipoproteína de baixa densidade (LDL), lipoproteína de muito baixa densidade (VLDL) e glicose (GLIC) foram analisados antes do procedimento e após 6 e 12 semanas. RESULTADOS: Todos os animais apresentaram aumento de TG e VLDL. Em relação aos demais parâmetros, não ocorreu diferença entre as semanas 0 e 12 nos animais do grupo C. No grupo ET, observou-se aumento de CT e GLIC durante o experimento. No grupo AE, os níveis de CT, HDL e GLIC permaneceram inalterados enquanto os níveis de HDL se elevaram. CONCLUSÃO: Nossos achados sugerem que a esplenectomia total isolada altera o metabolismo lipídico em ratos alimentados com ração padrão e que o auto-implante esplênico é eficaz na restauração do seu controle.

Fagocitose e viabilidade monocitária de pacientes com esquistossomose mansônica na forma hepatoesplênica submetidos à esplenectomia e ao auto-implante esplênico / Phagocytes rate and cellular viability of the monocytes in patients with hepatosplenic schistosomiasis mansoni who underwent splenectomy and auto-implantation of spleen tissue

Esquistossomose mansônica persiste como problema médico-social no nordeste brasileiro. Em crianças, o tratamento cirúrgico inclui esplenectomia e auto-implante esplênico. Este procedimento reduz a septicemia pós-esplenectomia. O objetivo deste estudo foi analisar a taxa de fagocitose e viabilidade de fagócitos mononucleares em portadores de esquistossomose hepatoesplênica, submetidos à cirurgia, de 1991 a 2001. Dos 22 indivíduos analisados, 11 eram portadores de esquistossomose hepatoesplênica, submetidos à esplenectomia e auto-implante esplênico (Grupo estudo) e 11 eram sadios (Grupo Controle). Os grupos tinham média de idades similar e procediam da mesma zona endêmica (Timbaúba-PE). Não se evidenciou diferença na taxa de fagocitose comparando-se o grupo controle (36,1 por cento±4,9 por cento) e o grupo estudo (33,5 por cento±5,7 por cento), p=0,2773. Todavia, a viabilidade dos fagócitos após estímulo com lipopolissacarídio foi maior (94 por cento) no grupo controle, quando comparado ao grupo estudo (65 por cento), p<0,001. Pode-se concluir que a esplenose assegura função fagocitária normal em monócitos, entretanto, os fagócitos possuem menor viabilidade frente a um estímulo nocivo e duradouro.

Mansonic schistosomiasis remains a medical-social issue in Northeastern Brazil. In children, surgical treatment includes splenectomy and spleen autoimplantation. This procedure reduces post-splenectomy sepsis. The aim of this study was to analyze the phagocyte rate and the cellular viability of monocytes in patients with hepatosplenic schistosomiasis, who underwent splenectomy and spleen autoimplantation from 1991 to 2001. Of the 22 individuals analyzed, 11 were patients who underwent splenectomy and spleen autoimplantation (Study group) and 11 were healthy individuals from the same region (Control group). Both groups presented similar mean age. No difference was found in the phagocyte rate between the control group (36.1 percent±4.9 percent) and study group (33.5 percent±5.7 percent). However, phagocyte viability after stimulation with lipopolysaccharide was higher (94 percent) in control group, when compared to the study group (65 percent), p<0.001. It is possible to hypothesize that monocytes from the study group patients presented a reduced response to the microorganism challenge, in the face of a harmful and long-lasting stimulus.

Resistência de ratos à peritonite fecal quando submetidos a esplenectomia e auto-implante do baço no retroperitônio / Rats resistence to fecal peritonitis when subjected to total spleenectomy and auto-implant of the spleen in the retroperitoniun

OBJETIVO: O estudo foi desenvolvido para avaliar os efeitos do autotransplante esplênico na proteção contra sepse abdominal em ratos Wistar jovens e adultos. MÉTODOS: Foram utilizados 54 ratos Wistar jovens e adultos (90 e 180 dias respectivamente) sendo distribuídos em 3 grupos: Grupo Sham, onde os animais eram submetidos a laparotomia com manipulação de alças apenas (n=6 animais jovens adultos), Grupo Esplenectomia, no qual os animais eram submetidos a esplenectomia total (n=10 animais jovens e adultos) e Grupo Auto-implante, onde os animais eram submetidos a esplenectomia total e um terço do baço era implantado em uma bolsa no retroperitônio (n=10 animais jovens e adultos). Após três meses os animais eram submetidos a nova laparotomia com ligadura e perfuração do ceco para estimular a sepse abdominal e acompanhados até o momento do óbito para estabelecimento de uma curva de mortalidade. RESULTADOS: Houve recuperação do baço implantado em todos os animais. Não houve diferença significativa entre o tempo de óbito entre os grupos. Os animais jovens aparentemente tiveram uma melhor resposta embora não estatisticamente significativa. CONCLUSÃO: Este estudo demonstrou que o auto-implante de baço no retroperitônio não provê proteção efetiva contra sepse abdominal em comparação aos ratos esplenectomizados.

Estudo da regeneração esplênica autóloga e heterotópica em ratos / Antologus and heterotopic splenic regeneration in rats

OBJETIVO: estudar a regeneração esplênica dos fragmentos de baço autólogos e heterotópicos implantados na cavidade peritoneal e na tela subcutânea em ratos e comparar os seus aspectos histológicos e citológicos com baço normal. MÉTODOS: 44 ratos Wistar foram submetidos a esplenectomia e receberam fragmentos de auto-implante: GA = na tela subcutânea (n=22) e GB na cavidade peritoneal (n=22). GAI (n=11) e GAII (n=11) receberam implante de fragmento único. GBIII (n=11) e GBIV (n=11) receberam implantes de quatro fragmentos. O baço remanescente foi usado como controle. Após 5 semanas de foram submetidos à eutanásia e foram investigados os aspectos macroscópicos e microscópicos (histológicos e citológicos) dos fragmentos nos seus locais de implante. Os resultados foram submetidos a testes estatísticos não paramétricos(p>0,05). RESULTADOS: Não houve diferença estatística significante entre o grupo que recebeu implante na tela subcutânea (n=22) e o grupo da cavidade peritoneal (n=22). Quanto à presença ou ausência de tecidos esplênicos regenerados (p=0,182), também não apresentou diferença com significância estatística. Os estudos histológicos e citológicos do tecido regenerado não evidenciaram diferenças em relação ao grupo controle. CONCLUSÃO: A regeneração do tecido esplênico autólogo e heterotópico em ratos ocorre nas mesmas proporções tanto na tela subcutânea como na cavidade peritoneal. Os aspectos histológicos e citológicos são semelhantes aos do baço normal.

Avaliação do efeito da esplenectomia e auto-implante esplênico sobre algumas funções de monócitos em crianças com esquistossomose mansônica / Evaluation of the effect of splenectomy with autologous spleen tissue implantation in some monocyte functions in children with hepatosplenic schistosomiasis mansoni

Investigamos em portadores de esquistossomose hepatoesplênica após esplenectomia com ou sem auto-implante esplênico: índice de aderência, produção de superóxido (SP) e de TNF-alfa em monócitos, tratados ou não com tuftsina. Avaliamos três grupos: voluntários sadios CG (grupo controle) (n=12); esplenectomizados com auto-implante AG (n=18) e esplenectomizados sem auto-implante WAG (n=9). índice de aderência e TNF-alfa não diferiram entre os grupos. SP foi semelhante em CG e AG na 1ª hora após estimulação celular. SP foi maior em todos intervalos de tempo nos grupos CG e AG, comparados ao WAG. O tratamento com tuftsina recuperou o padrão de normalidade de SP em AG, com aumento da 1ª para a 2ª hora nos níveis do CG. O tratamento com tuftsina não alterou SP em WAG, permanecendo reduzida em todos intervalos. O auto-implante esplênico parece recuperar e manter os parâmetros imunológicos avaliados, que têm participação importante na resposta do hospedeiro às infecções.

Autotransplant of spleen tissue in children with schistosomiasis: evaluation of splenic function after splenosis

Autotransplantation of spleen tissue has been done, in the past ten years, in children with schistosomiasis mansoni with bleeding varices. The purposes of this investigation were: (1) to study the morphology and function of the remnant spleen tissue; (2) to quantify the production of tuftsin; and (3) to assess the immune response to pneomococcal vaccine of these patients. Twenty three children, who underwent splenectomy and autologous implantation of spleen tissue into the greater omentum were included in this investigation. The average postoperative follow-up is five years. Splenosis was proved by colloid liver-spleen scans. Search for Howell-Jolly bodies assessed the filtration function. Tuftsin and the titer of pneumococcal antibodies were quantified by ELISA. Splenosis was evident in all children; however, it was insufficient in two. Howell-Jolly bodies were found only in these two patients. The mean tuftsin serum concentration (335.0 ± 29.8 ng/ml) was inside the normal range. The immune response to pneumococcal vaccination was adequate in 15 patients; intermediate in four; and inadequate in four. From the results the following conclusions can be drawn: splenosis was efficient in maintaining the filtration splenic function in more than 90 percent and produced tuftsin inside the range of normality. It also provided the immunologic splenic response to pneumococcal vaccination in 65 percent of the patients of this series